一、培养基用途 【EOS-006】華やかな芸能界を夢見る18歳の新人タレントは「みんなやってるよ」で何でも言いなり。 小川瑞希2014-04-15Pandora&$Eos（Pandor130分钟

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 用于金黄色葡萄球菌耐热核酸酶的检测。金黄色葡萄球菌是引起东说念主、畜患病的常见的病原体之一，同期亦然食物等检会圭臬的紧迫监测病原体之一。而耐热核酸酶是产肠毒素金黄色葡萄球菌孕育的一个典型特征，是检测金黄色葡萄球菌浑浊的秀气特征之一。

二、培养基要素及使用要领

 1、培养基要素

要素

含量（g/1000mL）

脱氧核糖核酸（DNA）

0.3

氯化钙

1.1

氯化钠

10.0

三羟甲基氨基甲烷（Tris）

6.1

琼脂

10.0

pH 9.0±0.1

25℃

 2.使用要领

 称取本品27.58g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸溶解后冷却至稳妥温度，倾入无菌平板。

三、实验旨趣

 产肠毒素的金黄色葡萄球菌可产生胞外热暴露DNA酶，在滚水中水浴15min后仍可保执活性，水解DNA长链酿成数个单核苷酸构成的寡核苷酸链，使甲苯胺蓝由蓝色变成粉红色；氯化钙提供阳离子动作激活剂；氯化钠保管平衡的渗入压；三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂；琼脂为培养基的凝固剂。

四、实验要领及后果

 1、按使用要领制备培养基，在琼脂上打成直径2mm的小孔，抽出小孔中的琼脂。

 2、每个小孔加入约0.01ml水浴解决（在水浴中煮沸15min）后的可疑菌的肉汤培养物。

 3、将平板正置于培养箱中，36℃±0.1培养4小时。阳性反映为在小孔周围酿成至少扩张约1mm的粉红色的晕圈。

 4、金黄色葡萄球菌有粉红色晕圈，如图1-a、1-b所示；大肠埃希氏菌无粉红色晕圈，如图1-c所示。

a:金黄色葡萄球菌ATCC6538，b:金黄色葡萄球菌ATCC25923，c:大肠埃希氏菌ATCC25922

图1 甲苯胺蓝-DNA琼脂的微生物后果

五、在意事项

 1、成就培养基时，如弗成立即使用可分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，灭菌后的培养基可于室温顺放4个月无变化。使用时加热融解倾注平板，此培养基经数次融解后仍可使用。

 2、每个平板打孔数目可凭据实验情况增减，但需预留出晕圈界限，以防打孔位置过近影响阴阳性判断。 

 关系产物：

 甲苯胺蓝-DNA酶琼脂-点击稽察产物确定

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